產品簡介:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠軟骨、椎間盤、玻璃體及關節組織勻漿中的 Col Ⅱ 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于軟骨發育、骨關節炎、軟骨修復及細胞外基質代謝研究。
產品名稱:大鼠Ⅱ型膠原(Col Ⅱ)elisa試劑盒
英文名稱:Col Ⅱ ELISA Kit
產品規格:48T/96T
貨號:CS-6269E
檢測原理:
大鼠Ⅱ型膠原 (Col Ⅱ) elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標記的檢測抗體進行識別,最后通過底物顯色反應來定量檢測。
固相化:微孔板預先包被抗大鼠 Col Ⅱ 抗體。
結合:加入標準品或樣本,Col Ⅱ 被固相抗體捕獲。
檢測:加入化的抗大鼠 Col Ⅱ 抗體和 HRP 標記親和素,形成抗體 - 抗原 - 酶標抗體復合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍色變為黃色。
測定:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
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實驗步驟?:
1.平衡試劑:試劑盒室溫平衡 30 min,濃縮洗滌液按比例稀釋備用。
2.加樣:設空白孔、標準品孔、樣品孔,每孔加對應標準品 / 稀釋后樣本,封板溫育。
3.溫育反應:37℃孵育 30–60 min,完成抗原抗體結合。
4.洗板:棄液甩干,洗滌液注滿每孔,浸泡后拍干,重復洗板3–5 次。
5.加酶結合物:除空白孔外,每孔加入 HRP 標記抗體,封板 37℃再次溫育。
6.再次洗板:同上述洗板流程,洗凈未結合游離酶標物。
7.顯色:每孔先后加入 A、B 顯色液,避光 37℃顯色 10–15 min。
8.終止讀數:加終止液終止反應,顏色由藍變黃;立即用酶標儀在對應波長測定 OD 值。
9.結果計算:以標準品濃度、OD 值繪制標準曲線,換算樣本待測指標濃度。