產品簡介:

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠血清、血漿、腸組織勻漿及細胞上清液中的二胺氧化酶(DAO)蛋白濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于腸道屏障功能損傷、腸黏膜通透性、胃腸疾病及食物中毒相關研究領域。
產品名稱:大鼠二胺氧化酶(DAO)elisa試劑盒
英文名稱:DAO ELISA Kit
產品規格:48T/96T
產品貨號:CS-5953E
檢測原理:

本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠血清、血漿、腸組織勻漿及細胞上清液中的二胺氧化酶(DAO)蛋白濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于腸道屏障功能損傷、腸黏膜通透性、胃腸疾病及食物中毒相關研究領域。
大鼠二胺氧化酶 (DAO) ELISA 試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標記的檢測抗體進行識別,最后通過底物顯色反應來定量檢測。
固相化:微孔板預先包被抗大鼠 DAO 抗體。
結合:加入標準品或樣本,DAO 被固相抗體捕獲。
檢測:加入生物su化的抗大鼠 DAO 抗體和 HRP 標記的親和素,形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化后由藍色變為黃色。
測定:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
實驗步驟?:

?試劑準備?:將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),洗滌緩沖液按1:19稀釋。標準品梯度稀釋至所需濃度。
?加樣?:每孔加入100μL標準品或樣本,37℃孵育90分鐘。
?洗滌?:棄去液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后甩干,重復5次。
?加檢測抗體?:每孔加入100μL檢測抗體-HRP,37℃孵育60分鐘。
?洗滌?:同步驟3。
?顯色?:每孔加入90μL TMB底物A+B混合液,37℃避光孵育15分鐘。
?終止?:每孔加入50μL終止液,立即搖勻(顏色由藍變黃)。
?檢測?:450nm波長測定吸光度(OD值),15分鐘內完成。
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操作步驟?:

1.平衡試劑:試劑盒室溫平衡 30 min,濃縮洗滌液按比例稀釋備用。
2.加樣:設空白孔、標準品孔、樣品孔,每孔加對應標準品 / 稀釋后樣本,封板溫育。
3.溫育反應:37℃孵育 30–60 min,完成抗原抗體結合。
4.洗板:棄液甩干,洗滌液注滿每孔,浸泡后拍干,重復洗板3–5 次。
5.加酶結合物:除空白孔外,每孔加入 HRP 標記抗體,封板 37℃再次溫育。
6.再次洗板:同上述洗板流程,洗凈未結合游離酶標物。
7.顯色:每孔先后加入 A、B 顯色液,避光 37℃顯色 10–15 min。
8.終止讀數:加終止液終止反應,顏色由藍變黃;立即用酶標儀在對應波長測定 OD 值。
9.結果計算:以標準品濃度、OD 值繪制標準曲線,換算樣本待測指標濃度。