產品簡介：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠支氣管肺泡灌洗液、肺組織勻漿中的肺表面活性物質相關蛋白 C（SP-C）蛋白濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達 0.16 ng/mL，適用于肺發育、急性肺損傷、呼吸窘迫綜合征及肺部疾病研究等領域。
產品名稱：大鼠肺表面活性物質相關蛋白Celisa試劑盒
英文名稱：SP-C ELISA Kit
產品規格：48T/96T
產品貨號：CS-5938E
檢測原理：
大鼠肺表面活性物質相關蛋白 C (SP-C) ELISA 試劑盒的原理是?雙抗體夾心法?，通過固相載體捕獲抗原，再用酶標記的檢測抗體進行識別，最后通過底物顯色反應來定量檢測。
?固相化?：微孔板預先包被抗大鼠 SP-C 抗體。
?結合?：加入標準品或樣本，SP-C 被固相抗體捕獲。
?檢測?：加入生物su化的抗大鼠 SP-C 抗體和 HRP 標記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
?顯色?：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍色變為黃色。
?測定?：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
實驗步驟?：
?1.試劑提前室溫平衡 30 min，濃縮洗滌液按說明書稀釋配制。
2.設置空白孔、標準品孔、待測樣品孔，精準加樣后封板。
3.37℃恒溫孵育結合反應，結束后棄孔內液體拍干。
4.加滿洗滌液浸泡清洗，重復洗板 3–5 次，去除未結合雜質。
5.除空白孔外，每孔加入 HRP 酶結合物，再次 37℃溫育。
6.重復洗板流程洗凈游離酶標抗體，保證背景干凈。
7.依次加入顯色液避光顯色，待梯度藍色清晰顯現。
8.加入終止液終止反應，顏色由藍轉黃，即刻用酶標儀讀取 OD 值。
9.根據標準曲線擬合計算，得出樣本目標物質濃度。
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操作步驟?：
?1、試劑與樣本準備?：
將試劑盒平衡至室溫（20-25℃），按說明書稀釋洗滌緩沖液（通常1:19）。
?標準品?：用梯度稀釋至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列濃度。
?樣本?：血清、血漿或組織勻漿上清。若t-PA濃度高，可按說明書（如1:10）稀釋。
?2、加樣與孵育?：
每孔加入100μL標準品或樣本。
輕輕振蕩混勻，避免觸碰孔壁。
37℃孵育90分鐘（部分試劑盒可能為120分鐘，需以說明書為準）。
?3、洗滌?：
棄去孔內液體，用洗滌緩沖液加滿每孔，靜置30秒后甩干，重復5-6次。
4?、加檢測抗體與孵育?：
每孔加入100μL化抗豬t-PA檢測抗體。
37℃孵育60分鐘。
5?、再次洗滌?：
同步驟3，洗去未結合抗體。
6?、顯色?：
每孔加入90-100μL TMB底物混合液（A液+B液）。
37℃避光孵育10-15分鐘。
?7、終止與測定?：
每孔加入50μL終止液，立即混勻（顏色由藍變黃）。
在加終止液后15分鐘內，用酶標儀在450nm波長處測定各孔吸光度（OD值）。
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