產(chǎn)品簡介:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠下丘腦組織、血清、血漿及腦組織勻漿中的 AGRP 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于食欲調(diào)控、能量代謝、肥胖模型、下丘腦攝食環(huán)路及內(nèi)分泌代謝研究。
產(chǎn)品名稱:大鼠Agouti相關(guān)蛋白(AGRP)elisa試劑盒
英文名稱:AGRP ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
貨號:CS-6239E
檢測原理:
大鼠Agouti相關(guān)蛋白(AGRP) elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標(biāo)記的檢測抗體進行識別,最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測。
固相化:微孔板預(yù)先包被抗大鼠 AGRP 抗體。
結(jié)合:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,AGRP 被固相抗體捕獲。
檢測:加入化的抗大鼠 AGRP 抗體和 HRP 標(biāo)記親和素,形成抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍色變?yōu)辄S色。
測定:用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
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實驗步驟?:
1.試劑平衡試劑盒室溫平衡 30 min;濃縮洗滌液按說明書稀釋混勻。
2.設(shè)孔加樣設(shè)空白、標(biāo)準(zhǔn)品、待測樣品孔,精準(zhǔn)加樣,封板。
3.溫育結(jié)合37℃孵育 30–60 min,棄液拍干。
4.洗板加滿洗滌液浸泡,甩干拍干,重復(fù)3–5 次。
5.加酶結(jié)合物除空白孔外每孔加 HRP 標(biāo)記液,封板 37℃孵育。
6.再次洗板充分洗凈未結(jié)合游離酶,控干殘留液體。
7.顯色避光加顯色液 A/B,避光 37℃顯色 10–15 min。
8.終止讀數(shù)加終止液變色穩(wěn)定后,立刻酶標(biāo)儀讀 OD 值。
9.結(jié)果計算標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合,換算樣本濃度。