本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿中的 MCT 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于肥大細胞活化、過敏反應、哮喘、蕁麻疹及過敏性炎癥研究。
產品名稱 | 大鼠肥大細胞類(MCT)elisa試劑盒 | 英文名稱 | MCT ELISA Kit |
貨號 | CS-5942E | 規格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理:
固相化:微孔板預先包被抗大鼠 MCT 抗體。
結合:加入標準品或樣本,MCT 被固相抗體捕獲。
檢測:加入化的抗大鼠 MCT 抗體和 HRP 標記親和素,形成抗體 - 抗原 - 酶標抗體復合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍色變為黃色。
測定:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
樣本要求:

1. 樣本類型與處理
血清:無熱源無菌采血管采集,杜絕溶血、脂血污染;1000×g 離心 10 min 分離上清,-20℃分裝保存,嚴禁反復凍融。血漿:選用 EDTA / 檸檬酸鹽 / 肝素抗凝管采血混勻,離心去除血細胞取上清備用(部分試劑盒慎用肝素)。細胞上清:收集后 1000×g 離心 10 min 去除細胞碎片與雜質,-70~-80℃低溫保存。組織勻漿:預冷生理鹽水 / PBS 冰上制備勻漿,高速離心取澄清上清,-20℃避光分裝貯存。
2. 通用注意事項
1) 樣本嚴禁添加疊氮鈉(NaN?),會抑制 HRP 酶活性,導致顯色失效。
2) 所有樣本避免室溫久置,全程低溫操作,防止蛋白降解。
3) 溶血、渾濁、微生物污染樣本直接廢棄,干擾抗體抗原結合。
4) 細胞上清、低豐度指標樣本務必設置復孔,校正實驗誤差。
5) 檢測濃度超標時,僅用試劑盒配套稀釋液稀釋,匹配基質體系。
操作步驟:

關鍵實操技巧
1.加樣技巧
一次性換新槍頭,垂直貼孔壁低位加液;避免氣泡、飛濺交叉污染;整板加樣速度均勻統一。
2.溫育控溫
須37℃恒溫、封板膜嚴實防蒸發冷凝;時間嚴格卡死,過長背景高、過短信號低。
3.洗板核心
每孔注滿不溢出,浸泡≥30 s;拍干用無塵吸水紙,杜絕殘留;洗板不足直接高背景、假陽性。
4.樣本規范
杜溶血、脂濁、污染樣本;禁止反復凍融;嚴禁含 NaN?抑制 HRP 活性;濃度超標只用試劑盒配套稀釋液。
5.顯色與讀數
全避光;整板顯色時長一致;加終止液立刻讀數,放置越久數值漂移越大。
6.基礎質控
樣本、標準均做復孔;室溫潔凈避光操作;試劑分裝取用,減少反復開蓋失效。
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