本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠支氣管肺泡灌洗液、肺組織勻漿中的 SP-B 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達 0.16 ng/mL，適用于肺泡表面活性功能、新生兒呼吸窘迫模型、肺損傷修復研究。
產品名稱 | 大鼠肺表面活性物質相關蛋白Belisa試劑盒 | 英文名稱 | SP-B ELISA Kit |
貨號 | CS-5939E | 規格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理：
固相化：微孔板預先包被抗大鼠 SP-B 抗體。
結合：加入標準品或樣本，SP-B 被固相抗體捕獲。
檢測：加入化的抗大鼠 SP-B 抗體和 HRP 標記親和素，形成抗體 - 抗原 - 酶標抗體復合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由藍色變為黃色。
測定：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
樣本要求：
1. 血清：避免溶血脂血，離心分離，-20℃分裝，禁反復凍融。
2. 血漿：EDTA / 檸檬酸鹽抗凝，慎用肝素，離心取上清。
3. 細胞上清：離心除雜質，-80℃保存。
4. 組織勻漿：冰上勻漿、高速離心取上清低溫儲存。
5. 禁忌：勿加疊氮鈉抑制 HRP；拒收污染溶血樣本，建議復孔檢測。
操作步驟：
1.平衡試劑：試劑盒室溫平衡 30 min，濃縮洗滌液按比例稀釋備用。
2.加樣：設空白孔、標準品孔、樣品孔，每孔加對應標準品 / 稀釋后樣本，封板溫育。
3.溫育反應：37℃孵育 30–60 min，完成抗原抗體結合。
4.洗板：棄液甩干，洗滌液注滿每孔，浸泡后拍干，重復洗板3–5 次。
5.加酶結合物：除空白孔外，每孔加入 HRP 標記抗體，封板 37℃再次溫育。
6.再次洗板：同上述洗板流程，洗凈未結合游離酶標物。
7.顯色：每孔先后加入 A、B 顯色液，避光 37℃顯色 10–15 min。
8.終止讀數：加終止液終止反應，顏色由藍變黃；立即用酶標儀在對應波長測定 OD 值。
9.結果計算：以標準品濃度、OD 值繪制標準曲線，換算樣本待測指標濃度。
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