產品簡介：
本試劑盒采用比濁法酶聯免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠血清中的補體溶血活性（AH50）。檢測范圍覆蓋 0.313-20 CH50U/mL，靈敏度達 0.16 CH50U/mL，適用于補體系統整體功能、免疫缺陷病、感染性疾病及自身免疫病研究等領域。
產品名稱：(AH50)elisa試劑盒
英文名稱：AH50 ELISA Kit
產品規格：48T/96T
產品貨號：CS-6043E
檢測原理：
大鼠補體溶血活性 (AH50) ELISA 試劑盒的原理是?比濁法?，通過補體介導的紅細胞溶血反應，利用吸光度變化來定量檢測補體的整體溶血活性。
?固相化?：微孔板預先包被綿羊紅細胞懸液與抗體的復合物。
?結合?：加入標準品或樣本，補體與復合物結合并激活補體溶菌通路。
?檢測?：紅細胞發生溶血，釋放血紅蛋白，使反應液出現濁度變化。
?顯色?：無需額外底物，直接通過血紅蛋白的吸光度變化反映溶血程度。
?測定?：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，活性與 OD 值成正比。
實驗步驟?：
?1. 試劑回溫至 20–25℃，稀釋洗滌液、梯度配制標準品。
2. 每孔加 100μL 標準 / 樣本，37℃孵育 90min，洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗體，37℃孵育 60min，再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光顯色 15min，加終止液混勻。
5. 450nm 快速測 OD 值，擬合曲線算濃度。
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操作步驟?：
?1、試劑與樣本準備?：
將試劑盒平衡至室溫（20-25℃），按說明書稀釋洗滌緩沖液（通常1:19）。
?標準品?：用梯度稀釋至0.313、0.625、1.25、2.5、5、10、20 ng/mL系列濃度。
?樣本?：血清、血漿或組織勻漿上清。若t-PA濃度高，可按說明書（如1:10）稀釋。
?2、加樣與孵育?：
每孔加入100μL標準品或樣本。
輕輕振蕩混勻，避免觸碰孔壁。
37℃孵育90分鐘（部分試劑盒可能為120分鐘，需以說明書為準）。
?3、洗滌?：
棄去孔內液體，用洗滌緩沖液加滿每孔，靜置30秒后甩干，重復5-6次。
4?、加檢測抗體與孵育?：
每孔加入100μL化抗豬t-PA檢測抗體。
37℃孵育60分鐘。
5?、再次洗滌?：
同步驟3，洗去未結合抗體。
6?、顯色?：
每孔加入90-100μL TMB底物混合液（A液+B液）。
37℃避光孵育10-15分鐘。
?7、終止與測定?：
每孔加入50μL終止液，立即混勻（顏色由藍變黃）。
在加終止液后15分鐘內，用酶標儀在450nm波長處測定各孔吸光度（OD值）。
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