產品簡介:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠關節液、血清、軟骨組織勻漿中的 HELIX-Ⅱ 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于軟骨降解、骨關節炎、關節損傷及軟骨基質代謝研究。
產品名稱:大鼠Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ)elisa試劑盒
英文名稱:HELIX-Ⅱ ELISA Kit
產品規格:48T/96T
貨號:CS-6267E
檢測原理:
大鼠Ⅱ型膠原螺旋肽(HELIX-Ⅱ) elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標記的檢測抗體進行識別,最后通過底物顯色反應來定量檢測。
固相化:微孔板預先包被抗大鼠 HELIX-Ⅱ 抗體。
結合:加入標準品或樣本,HELIX-Ⅱ 被固相抗體捕獲。
檢測:加入化的抗大鼠 HELIX-Ⅱ 抗體和 HRP 標記親和素,形成抗體 - 抗原 - 酶標抗體復合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍色變為黃色。
測定:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
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實驗步驟?:
1.試劑準備
將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),濃縮洗滌液按 1:20 稀釋備用。
標準品按說明書進行梯度稀釋,配制系列濃度標準曲線溶液。
2.實驗流程
加樣:設置空白孔、標準孔、待測樣品孔,空白孔僅加稀釋液,其余孔分別加入標準品或待測樣品,37℃孵育。
加酶標抗體:除空白孔外,每孔加入酶標抗體,輕輕混勻,37℃避光孵育。
洗滌:棄去孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后甩干,重復洗滌 4-5 次,最后拍干殘留液體。
顯色:每孔加入 TMB 顯色液,37℃避光孵育,孔內呈現藍色。
終止:每孔加入終止液,混勻后顏色由藍色轉為黃色。
檢測:在 450nm 波長下測定各孔 OD 值,15 分鐘內完成讀數。
3.關鍵提示
實驗全程嚴格控溫,孵育時使用封板膜避免蒸發。
洗滌需充分,否則易造成高背景、結果偏差。
顯色液需避光,終止順序與加樣順序保持一致,確保充分混勻。