產(chǎn)品簡介:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠尿液、血清、血漿及腎上腺組織勻漿中的 17-KS 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL,適用于腎上腺皮質(zhì)功能、雄激素代謝、內(nèi)分泌軸及類固醇激素代謝研究。
產(chǎn)品名稱:大鼠17-酮類固醇(17-KS)elisa試劑盒
英文名稱:17-KS ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
貨號:CS-6281E
檢測原理:
大鼠17-酮類固醇(17-KS) elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標(biāo)記的檢測抗體進(jìn)行識別,最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測。
固相化:微孔板預(yù)先包被抗大鼠 17-KS 抗體。
結(jié)合:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,17-KS 被固相抗體捕獲。
檢測:加入化的抗大鼠 17-KS 抗體和 HRP 標(biāo)記親和素,形成抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測定:用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
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實驗步驟?:
1.平衡試劑:試劑盒室溫平衡 30 min,濃縮洗滌液按比例稀釋備用。
2.加樣:設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔、樣品孔,每孔加對應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品 / 稀釋后樣本,封板溫育。
3.溫育反應(yīng):37℃孵育 30–60 min,完成抗原抗體結(jié)合。
4.洗板:棄液甩干,洗滌液注滿每孔,浸泡后拍干,重復(fù)洗板3–5 次。
5.加酶結(jié)合物:除空白孔外,每孔加入 HRP 標(biāo)記抗體,封板 37℃再次溫育。
6.再次洗板:同上述洗板流程,洗凈未結(jié)合游離酶標(biāo)物。
7.顯色:每孔先后加入 A、B 顯色液,避光 37℃顯色 10–15 min。
8.終止讀數(shù):加終止液終止反應(yīng),顏色由藍(lán)變黃;立即用酶標(biāo)儀在對應(yīng)波長測定 OD 值。
9.結(jié)果計算:以標(biāo)準(zhǔn)品濃度、OD 值繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,換算樣本待測指標(biāo)濃度。