本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠細胞膜、組織勻漿中的 PKCε 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達 0.16 ng/mL，適用于心肌保護、神經(jīng)信號、腫瘤遷移及亞型特異性通路研究。
產(chǎn)品名稱 | epsilon(PKCε)elisa試劑盒 | 英文名稱 | PKCε ELISA Kit |
貨號 | CS-5982E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理：
固相化：微孔板預先包被抗大鼠 PKCε 亞型特異性抗體。
結合：加入標準品或樣本，PKCε 被固相抗體捕獲。
檢測：加入化亞型特異性檢測抗體和 HRP 標記親和素，形成抗體 - 抗原 - 酶標抗體復合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由藍色變?yōu)辄S色。
測定：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
樣本要求：
1. 樣本處理
1) 血清：無菌無熱源采集，避免溶血 / 脂血；1000×g 離心 10 min 取上清，-20℃分裝，禁反復凍融。
2) 血漿：EDTA / 檸檬酸鹽抗凝（慎用肝素），離心分離上清。
3) 細胞上清：1000×g 離心除碎片，-70~-80℃保存。
4) 組織勻漿：預冷 PBS / 生理鹽水冰上勻漿，高速離心取清亮上清低溫保存。
2. 通用注意
嚴禁加NaN3抑制 HRP 活性；杜絕溶血、渾濁、污染樣本；全程低溫防降解；超標樣本用試劑盒專用稀釋液稀釋，實驗建議設置復孔。
操作步驟：
1.試劑平衡試劑盒室溫平衡 30 min；濃縮洗滌液按說明書稀釋混勻。
2.設孔加樣設空白、標準品、待測樣品孔，精準加樣，封板。
3.溫育結合37℃孵育 30–60 min，棄液拍干。
4.洗板加滿洗滌液浸泡，甩干拍干，重復3–5 次。
5.加酶結合物除空白孔外每孔加 HRP 標記液，封板 37℃孵育。
6.再次洗板充分洗凈未結合游離酶，控干殘留液體。
7.顯色避光加顯色液 A/B，避光 37℃顯色 10–15 min。
8.終止讀數(shù)加終止液變色穩(wěn)定后，立刻酶標儀讀 OD 值。
9.結果計算標準曲線擬合，換算樣本濃度。
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