本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠關(guān)節(jié)滑液、軟骨組織、組織勻漿中的 PRG4 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL，適用于關(guān)節(jié)潤滑、軟骨保護(hù)、骨關(guān)節(jié)炎及關(guān)節(jié)損傷修復(fù)研究。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠蛋白聚糖4(PRG4)elisa試劑盒 | 英文名稱 | PRG4 ELISA Kit |
貨號 | CS-5979E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
核心原理：
固相化：微孔板預(yù)先包被抗大鼠 PRG4 抗體。
結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，PRG4 被固相抗體捕獲。
檢測：加入化的抗大鼠 PRG4 抗體和 HRP 標(biāo)記親和素，形成抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測定：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
樣本要求：
1. 樣本處理
1) 血清：無菌無熱源采集，避免溶血 / 脂血；1000×g 離心 10 min 取上清，-20℃分裝，禁反復(fù)凍融。
2) 血漿：EDTA / 檸檬酸鹽抗凝（慎用肝素），離心分離上清。
3) 細(xì)胞上清：1000×g 離心除碎片，-70~-80℃保存。
4) 組織勻漿：預(yù)冷 PBS / 生理鹽水冰上勻漿，高速離心取清亮上清低溫保存。
2. 通用注意
嚴(yán)禁加NaN3抑制 HRP 活性；杜絕溶血、渾濁、污染樣本；全程低溫防降解；超標(biāo)樣本用試劑盒專用稀釋液稀釋，實(shí)驗(yàn)建議設(shè)置復(fù)孔。
操作步驟：
1. 試劑回溫至 20–25℃，稀釋洗滌液、梯度配制標(biāo)準(zhǔn)品。
2. 每孔加 100μL 標(biāo)準(zhǔn) / 樣本，37℃孵育 90min，洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗體，37℃孵育 60min，再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光顯色 15min，加終止液混勻。
5. 450nm 快速測 OD 值，擬合曲線算濃度。
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