本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的 Hsp-60 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達 0.16 ng/mL，適用于線粒體蛋白穩態、細胞應激、自身免疫炎癥及組織損傷研究等領域。
產品名稱 |
大鼠熱休克蛋白60(Hsp-60)elisa試劑盒 | 英文名稱 | Hsp-60 ELISA Kit |
貨號 | CS-5552E | 規格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理：
固相化：微孔板預先包被抗大鼠 Hsp-60 抗體。
結合：加入標準品或樣本，Hsp-60 被固相抗體捕獲。
檢測：加入化的抗大鼠 Hsp-60 抗體和 HRP 標記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由藍色變為黃色。
測定：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
樣本要求：
1. 樣本類型與處理
?血清?：使用無熱原/內毒素試管采集，避免溶血或脂血。1000×g離心10分鐘分離血清，-20℃保存，避免反復凍融。
?血漿?：EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝，離心后取上清。
?細胞上清?：1000×g離心10分鐘去除顆粒，-70℃保存。
?組織勻漿?：生理鹽水勻漿后離心取上清，-20℃保存。
2. 注意事項
樣本中禁止添加NaN3，以免抑制HRP活性。
細胞培養上清可能因細胞狀態等因素導致檢測波動，建議設復孔。
操作步驟：
1. 試劑回溫至 20–25℃，稀釋洗滌液、梯度配制標準品。
2. 每孔加 100μL 標準 / 樣本，37℃孵育 90min，洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗體，37℃孵育 60min，再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光顯色 15min，加終止液混勻。
5. 450nm 快速測 OD 值，擬合曲線算濃度。
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