本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的 p-NF-κB 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達 0.16 ng/mL，適用于炎癥信號激活、免疫應答、氧化應激及炎癥相關疾病研究等領域。
產品名稱 | 大鼠磷酸化核因子p-NF-κBelisa試劑盒 | 英文名稱 | p-NF-κB ELISA Kit |
貨號 | CS-5667E | 規格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理：
固相化：微孔板預先包被抗大鼠 p-NF-κB 抗體。
結合：加入標準品或樣本，p-NF-κB 被固相抗體捕獲。
檢測：加入化的抗大鼠 p-NF-κB 抗體和 HRP 標記的親和素，形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由藍色變為黃色。
測定：用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
樣本要求：
1. 樣本處理
1) 血清：無菌無熱源采血管采集，避免溶血 / 脂血；1000×g 離心 10 min 取上清，-20℃分裝，禁反復凍融。
2) 血漿：EDTA / 檸檬酸鹽抗凝（慎用肝素），離心分離上清。
3) 細胞上清：1000×g 離心除碎片，-70~-80℃保存。
4) 組織勻漿：預冷 PBS / 生理鹽水冰上勻漿，高速離心取清亮上清低溫保存。
2. 通用注意
嚴禁加NaN3抑制 HRP 活性；杜絕溶血、渾濁、污染樣本；全程低溫防降解；超標樣本用試劑盒專用稀釋液稀釋，實驗建議設置復孔。
操作步驟：
關鍵實操技巧
1.加樣技巧
一次性換新槍頭，垂直貼孔壁低位加液；避免氣泡、飛濺交叉污染；整板加樣速度均勻統一。
2.溫育控溫
須37℃恒溫、封板膜嚴實防蒸發冷凝；時間嚴格卡死，過長背景高、過短信號低。
3.洗板核心
每孔注滿不溢出，浸泡≥30 s；拍干用無塵吸水紙，杜絕殘留；洗板不足直接高背景、假陽性。
4.樣本規范
杜溶血、脂濁、污染樣本；禁止反復凍融；嚴禁含 NaN?抑制 HRP 活性；濃度超標只用試劑盒配套稀釋液。
5.顯色與讀數
全避光；整板顯色時長一致；加終止液立刻讀數，放置越久數值漂移越大。
6.基礎質控
樣本、標準均做復孔；室溫潔凈避光操作；試劑分裝取用，減少反復開蓋失效。
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