本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的 CC16 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于氣道上皮損傷、肺部炎癥、肺屏障功能及呼吸系統病變評價研究等領域。
產品名稱 | 大鼠克拉拉細胞蛋白(CC16)elisa試劑盒 | 英文名稱 | CC16 ELISA Kit |
貨號 | CS-5682E | 規格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理:
固相化:微孔板預先包被抗大鼠 CC16 抗體。
結合:加入標準品或樣本,CC16 被固相抗體捕獲。
檢測:加入化的抗大鼠 CC16 抗體和 HRP 標記的親和素,形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍色變為黃色。
測定:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
樣本要求:
1. 樣本類型與處理
?血清?:使用無熱原/內毒素試管采集,避免溶血或脂血。1000×g離心10分鐘分離血清,-20℃保存,避免反復凍融。
?血漿?:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝,離心后取上清。
?細胞上清?:1000×g離心10分鐘去除顆粒,-70℃保存。
?組織勻漿?:生理鹽水勻漿后離心取上清,-20℃保存。
2. 注意事項
樣本中禁止添加NaN3,以免抑制HRP活性。
細胞培養上清可能因細胞狀態等因素導致檢測波動,建議設復孔。
操作步驟:
關鍵實操技巧
1.加樣技巧
一次性換新槍頭,垂直貼孔壁低位加液;避免氣泡、飛濺交叉污染;整板加樣速度均勻統一。
2.溫育控溫
須37℃恒溫、封板膜嚴實防蒸發冷凝;時間嚴格卡死,過長背景高、過短信號低。
3.洗板核心
每孔注滿不溢出,浸泡≥30 s;拍干用無塵吸水紙,杜絕殘留;洗板不足直接高背景、假陽性。
4.樣本規范
杜溶血、脂濁、污染樣本;禁止反復凍融;嚴禁含 NaN?抑制 HRP 活性;濃度超標只用試劑盒配套稀釋液。
5.顯色與讀數
全避光;整板顯色時長一致;加終止液立刻讀數,放置越久數值漂移越大。
6.基礎質控
樣本、標準均做復孔;室溫潔凈避光操作;試劑分裝取用,減少反復開蓋失效。
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