本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠血清、血漿、組織勻漿及細胞上清液中的 RF 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于類風濕關節炎模型、自身免疫反應、免疫復合物沉積及關節病變研究等領域。
產品名稱 | 大鼠類風濕因子(RF)elisa試劑盒 | 英文名稱 | RF ELISA Kit |
貨號 | CS-5679E | 規格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理:
固相化:微孔板預先包被抗大鼠 RF 抗體。
結合:加入標準品或樣本,RF 被固相抗體捕獲。
檢測:加入化的抗大鼠 RF 抗體和 HRP 標記的親和素,形成 "抗體 - 抗原 - 酶標抗體" 復合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍色變為黃色。
測定:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
樣本要求:
1. 樣本類型與處理
血清:無熱源無菌采血管采集,杜絕溶血、脂血污染;1000×g 離心 10 min 分離上清,-20℃分裝保存,嚴禁反復凍融。血漿:選用 EDTA / 檸檬酸鹽 / 肝素抗凝管采血混勻,離心去除血細胞取上清備用(部分試劑盒慎用肝素)。細胞上清:收集后 1000×g 離心 10 min 去除細胞碎片與雜質,-70~-80℃低溫保存。組織勻漿:預冷生理鹽水 / PBS 冰上制備勻漿,高速離心取澄清上清,-20℃避光分裝貯存。
2. 通用注意事項
1) 樣本嚴禁添加疊氮鈉(NaN?),會抑制 HRP 酶活性,導致顯色失效。
2) 所有樣本避免室溫久置,全程低溫操作,防止蛋白降解。
3) 溶血、渾濁、微生物污染樣本直接廢棄,干擾抗體抗原結合。
4) 細胞上清、低豐度指標樣本務必設置復孔,校正實驗誤差。
5) 檢測濃度超標時,僅用試劑盒配套稀釋液稀釋,匹配基質體系。
操作步驟:
1. 試劑回溫至 20–25℃,稀釋洗滌液、梯度配制標準品。
2. 每孔加 100μL 標準 / 樣本,37℃孵育 90min,洗板 5 次。
3. 加 HRP 抗體,37℃孵育 60min,再次洗板 5 次。
4. 加 TMB 避光顯色 15min,加終止液混勻。
5. 450nm 快速測 OD 值,擬合曲線算濃度。
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