本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠血清、血漿中的 AMA 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達 0.16 ng/mL,適用于單核細胞相關自身免疫、炎癥免疫、血液免疫病變研究等領域。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠抗單核細胞抗體(AMA)elisa試劑盒 | 英文名稱 | AMA ELISA Kit |
貨號 | CS-5735E | 規(guī)格 | 48T/96T |
保存 | 避光保存 | 用途 | 僅供科研實驗 |
核心原理:
固相化:微孔板預先包被單核細胞表面抗原。
結(jié)合:加入標準品或樣本,AMA 與抗原結(jié)合。
檢測:加入化的二抗及 HRP 標記親和素,形成復合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍色變?yōu)辄S色。
測定:用酶標儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
樣本要求:
1. 血清:避免溶血脂血,離心分離,-20℃分裝,禁反復凍融。
2. 血漿:EDTA / 檸檬酸鹽抗凝,慎用肝素,離心取上清。
3. 細胞上清:離心除雜質(zhì),-80℃保存。
4. 組織勻漿:冰上勻漿、高速離心取上清低溫儲存。
5. 禁忌:勿加疊氮鈉抑制 HRP;拒收污染溶血樣本,建議復孔檢測。
操作步驟:
1.試劑提前室溫平衡 30 min,濃縮洗滌液按說明書稀釋配制。
2.設置空白孔、標準品孔、待測樣品孔,精準加樣后封板。
3.37℃恒溫孵育結(jié)合反應,結(jié)束后棄孔內(nèi)液體拍干。
4.加滿洗滌液浸泡清洗,重復洗板 3–5 次,去除未結(jié)合雜質(zhì)。
5.除空白孔外,每孔加入 HRP 酶結(jié)合物,再次 37℃溫育。
6.重復洗板流程洗凈游離酶標抗體,保證背景干凈。
7.依次加入顯色液避光顯色,待梯度藍色清晰顯現(xiàn)。
8.加入終止液終止反應,顏色由藍轉(zhuǎn)黃,即刻用酶標儀讀取 OD 值。
9.根據(jù)標準曲線擬合計算,得出樣本目標物質(zhì)濃度。
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