產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專(zhuān)用于定量檢測(cè)大鼠血清、血漿中的 α1-AGP 濃度。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL,適用于急性期炎癥反應(yīng)、感染、創(chuàng)傷、腫瘤及炎癥活動(dòng)性評(píng)價(jià)研究。
產(chǎn)品名稱(chēng):大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP)elisa試劑盒
英文名稱(chēng):α1-AGP ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
貨號(hào):CS-6143E
檢測(cè)原理:
大鼠α1酸性糖蛋白(α1-AGP) elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過(guò)固相載體捕獲抗原,再用酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體進(jìn)行識(shí)別,最后通過(guò)底物顯色反應(yīng)來(lái)定量檢測(cè)。
固相化:微孔板預(yù)先包被抗大鼠 α1-AGP 抗體。
結(jié)合:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,α1-AGP 被固相抗體捕獲。
檢測(cè):加入化的抗大鼠 α1-AGP 抗體和 HRP 標(biāo)記親和素,形成抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測(cè)定:用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
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實(shí)驗(yàn)步驟?:
1.試劑準(zhǔn)備
將試劑盒平衡至室溫(20-25℃),濃縮洗滌液按 1:20 稀釋備用。
標(biāo)準(zhǔn)品按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行梯度稀釋?zhuān)渲葡盗袧舛葮?biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)溶液。
2.實(shí)驗(yàn)流程
加樣:設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔,空白孔僅加稀釋液,其余孔分別加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品,37℃孵育。
加酶標(biāo)抗體:除空白孔外,每孔加入酶標(biāo)抗體,輕輕混勻,37℃避光孵育。
洗滌:棄去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,靜置 30 秒后甩干,重復(fù)洗滌 4-5 次,最后拍干殘留液體。
顯色:每孔加入 TMB 顯色液,37℃避光孵育,孔內(nèi)呈現(xiàn)藍(lán)色。
終止:每孔加入終止液,混勻后顏色由藍(lán)色轉(zhuǎn)為黃色。
檢測(cè):在 450nm 波長(zhǎng)下測(cè)定各孔 OD 值,15 分鐘內(nèi)完成讀數(shù)。
3.關(guān)鍵提示
實(shí)驗(yàn)全程嚴(yán)格控溫,孵育時(shí)使用封板膜避免蒸發(fā)。
洗滌需充分,否則易造成高背景、結(jié)果偏差。
顯色液需避光,終止順序與加樣順序保持一致,確保充分混勻。