產(chǎn)品簡介:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測大鼠心肌細(xì)胞、心臟組織、細(xì)胞核裂解液中的 GATA4 濃度。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL,適用于心肌發(fā)育、心肌肥厚、心臟重構(gòu)、心肌細(xì)胞分化及心血管轉(zhuǎn)錄調(diào)控研究。
產(chǎn)品名稱:大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4)elisa試劑盒
英文名稱:GATA4 ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
貨號(hào):CS-6192E
檢測原理:
大鼠GATA結(jié)合蛋白4(GATA4) elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標(biāo)記的檢測抗體進(jìn)行識(shí)別,最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測。
固相化:微孔板預(yù)先包被抗大鼠 GATA4 抗體。
結(jié)合:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,GATA4 被固相抗體捕獲。
檢測:加入化的抗大鼠 GATA4 抗體和 HRP 標(biāo)記親和素,形成抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測定:用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
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實(shí)驗(yàn)步驟?:
關(guān)鍵實(shí)操技巧
1.加樣技巧
一次性換新槍頭,垂直貼孔壁低位加液;避免氣泡、飛濺交叉污染;整板加樣速度均勻統(tǒng)一。
2.溫育控溫
須37℃恒溫、封板膜嚴(yán)實(shí)防蒸發(fā)冷凝;時(shí)間嚴(yán)格卡死,過長背景高、過短信號(hào)低。
3.洗板核心
每孔注滿不溢出,浸泡≥30 s;拍干用無塵吸水紙,杜絕殘留;洗板不足直接高背景、假陽性。
4.樣本規(guī)范
杜溶血、脂濁、污染樣本;禁止反復(fù)凍融;嚴(yán)禁含 NaN?抑制 HRP 活性;濃度超標(biāo)只用試劑盒配套稀釋液。
5.顯色與讀數(shù)
全避光;整板顯色時(shí)長一致;加終止液立刻讀數(shù),放置越久數(shù)值漂移越大。
6.基礎(chǔ)質(zhì)控
樣本、標(biāo)準(zhǔn)均做復(fù)孔;室溫潔凈避光操作;試劑分裝取用,減少反復(fù)開蓋失效。