產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測(cè)大鼠細(xì)胞核裂解液、細(xì)胞總蛋白、組織勻漿中的 P27 濃度。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL，靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL，適用于細(xì)胞周期調(diào)控、G1 期阻滯、腫瘤增殖抑制、藥物干預(yù)及周期蛋白相關(guān)信號(hào)研究。
產(chǎn)品名稱：大鼠P27蛋白(P27)elisa試劑盒
英文名稱:P27 ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
貨號(hào):CS-6170E
檢測(cè)原理：
大鼠P27蛋白(P27) elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法，通過固相載體捕獲抗原，再用酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體進(jìn)行識(shí)別，最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測(cè)。
固相化：微孔板預(yù)先包被抗大鼠 P27 抗體。
結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本，P27 被固相抗體捕獲。
檢測(cè)：加入化的抗大鼠 P27 抗體和 HRP 標(biāo)記親和素，形成抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測(cè)定：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長(zhǎng)測(cè)定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成正比。
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實(shí)驗(yàn)步驟?：
1.試劑提前室溫平衡 30 min，濃縮洗滌液按說明書稀釋配制。
2.設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣品孔，精準(zhǔn)加樣后封板。
3.37℃恒溫孵育結(jié)合反應(yīng)，結(jié)束后棄孔內(nèi)液體拍干。
4.加滿洗滌液浸泡清洗，重復(fù)洗板 3–5 次，去除未結(jié)合雜質(zhì)。
5.除空白孔外，每孔加入 HRP 酶結(jié)合物，再次 37℃溫育。
6.重復(fù)洗板流程洗凈游離酶標(biāo)抗體，保證背景干凈。
7.依次加入顯色液避光顯色，待梯度藍(lán)色清晰顯現(xiàn)。
8.加入終止液終止反應(yīng)，顏色由藍(lán)轉(zhuǎn)黃，即刻用酶標(biāo)儀讀取 OD 值。
9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合計(jì)算，得出樣本目標(biāo)物質(zhì)濃度。
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