產(chǎn)品簡介:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測(cè)植物細(xì)胞裂解液、葉片、根系及組織勻漿中的 ROS 水平。檢測(cè)范圍覆蓋 0.313-20 ng/mL,靈敏度達(dá) 0.16 ng/mL,適用于植物氧化應(yīng)激、逆境損傷、抗氧化系統(tǒng)及衰老生理研究。
產(chǎn)品名稱:植物活性氧(ROS)elisa試劑盒
英文名稱:ROS ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
貨號(hào):CS-6410E
檢測(cè)原理:
植物活性氧(ROS) elisa試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體進(jìn)行識(shí)別,最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測(cè)。
固相化:微孔板預(yù)先包被抗植物 ROS 相關(guān)抗體。
結(jié)合:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,ROS 被固相抗體捕獲。
檢測(cè):加入化的抗植物 ROS 抗體和 HRP 標(biāo)記親和素,形成抗體 - 抗原 - 酶標(biāo)抗體復(fù)合物。
顯色:加入 TMB 底物,被 HRP 催化由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測(cè)定:用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測(cè)定吸光度 (OD 值),濃度與 OD 值成正比。
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實(shí)驗(yàn)步驟?:
1.試劑提前室溫平衡 30 min,濃縮洗滌液按說明書稀釋配制。
2.設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測(cè)樣品孔,精準(zhǔn)加樣后封板。
3.37℃恒溫孵育結(jié)合反應(yīng),結(jié)束后棄孔內(nèi)液體拍干。
4.加滿洗滌液浸泡清洗,重復(fù)洗板 3–5 次,去除未結(jié)合雜質(zhì)。
5.除空白孔外,每孔加入 HRP 酶結(jié)合物,再次 37℃溫育。
6.重復(fù)洗板流程洗凈游離酶標(biāo)抗體,保證背景干凈。
7.依次加入顯色液避光顯色,待梯度藍(lán)色清晰顯現(xiàn)。
8.加入終止液終止反應(yīng),顏色由藍(lán)轉(zhuǎn)黃,即刻用酶標(biāo)儀讀取 OD 值。
9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合計(jì)算,得出樣本目標(biāo)物質(zhì)濃度。