產(chǎn)品簡介:
本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA),專用于定量檢測人尿液、血清、血漿、腎組織勻漿及細(xì)胞上清液中的中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運(yùn)載蛋白(NGAL)蛋白濃度。檢測范圍覆蓋0.313-20 ng/mL,靈敏度達(dá)0.16 ng/mL,適用于急性腎損傷、腎小管損傷、腎病進(jìn)展監(jiān)測及泌尿系統(tǒng)炎癥研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱:人尿NGAL Elisa檢測試劑盒
英文名稱:NGAL ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格:48T/96T
貨號:CS-6597E
檢測原理:
人尿 NGAL Elisa檢測試劑盒的原理是雙抗體夾心法,通過固相載體捕獲抗原,再用酶標(biāo)記的檢測抗體進(jìn)行識別,最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測。
固相化:微孔板預(yù)先包被抗人NGAL抗體。
結(jié)合:加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本,NGAL被固相抗體捕獲。
檢測:加入化的抗人NGAL抗體和HRP標(biāo)記的親和素,形成"抗體-抗原-酶標(biāo)抗體"復(fù)合物。
顯色:加入TMB底物,被HRP催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測定:用酶標(biāo)儀在450nm波長測定吸光度(OD值),濃度與OD值成正比。
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實(shí)驗(yàn)步驟?:
1.試劑提前室溫平衡 30 min,濃縮洗滌液按說明書稀釋配制。
2.設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)品孔、待測樣品孔,精準(zhǔn)加樣后封板。
3.37℃恒溫孵育結(jié)合反應(yīng),結(jié)束后棄孔內(nèi)液體拍干。
4.加滿洗滌液浸泡清洗,重復(fù)洗板 3–5 次,去除未結(jié)合雜質(zhì)。
5.除空白孔外,每孔加入 HRP 酶結(jié)合物,再次 37℃溫育。
6.重復(fù)洗板流程洗凈游離酶標(biāo)抗體,保證背景干凈。
7.依次加入顯色液避光顯色,待梯度藍(lán)色清晰顯現(xiàn)。
8.加入終止液終止反應(yīng),顏色由藍(lán)轉(zhuǎn)黃,即刻用酶標(biāo)儀讀取 OD 值。
9.根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合計(jì)算,得出樣本目標(biāo)物質(zhì)濃度。