產(chǎn)品簡介：
本試劑盒采用競爭法酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于定量檢測貝類組織、體液中的褪黑素（MT）含量。檢測范圍覆蓋 0.313-20 ng/g，靈敏度達(dá) 0.16 ng/g，適用于貝類晝夜節(jié)律、生殖調(diào)控、抗逆性及水產(chǎn)養(yǎng)殖研究等領(lǐng)域。
產(chǎn)品名稱：貝類褪黑素（MT）ELISA檢測試劑盒
英文名稱：MT ELISA Kit
產(chǎn)品規(guī)格：48T/96T
產(chǎn)品貨號：CS-00S996610
檢測原理：
貝類褪黑素ELISA 檢測試劑盒的原理是競爭法，通過固相載體包被抗原，樣本中抗原與固相抗原競爭結(jié)合特異性抗體，最后通過底物顯色反應(yīng)來定量檢測。
固相化：微孔板預(yù)先包被 MT 人工抗原。
結(jié)合：加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣本與特異性抗體混合液，MT 與固相抗原競爭結(jié)合抗體。
檢測：加入 HRP 標(biāo)記的二抗，與結(jié)合在固相載體上的抗體形成復(fù)合物。
顯色：加入 TMB 底物，被 HRP 催化后由藍(lán)色變?yōu)辄S色。
測定：用酶標(biāo)儀在 450nm 波長測定吸光度 (OD 值)，濃度與 OD 值成反比。
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實(shí)驗(yàn)步驟?：
1. 試劑準(zhǔn)備
將試劑盒所有組分平衡至室溫（20–25℃，≥30min）；濃縮洗滌液按 1:19 稀釋配制工作液。
標(biāo)準(zhǔn)品用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液復(fù)溶，梯度稀釋，配置系列濃度梯度標(biāo)準(zhǔn)溶液，備用。
2. 實(shí)驗(yàn)流程
加樣：設(shè)置空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、樣本孔，每孔加入 100 μL 對應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品 / 待測樣本，封板，37℃恒溫孵育 90 min。
洗滌：棄凈孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌工作液，靜置 30 s，甩干拍凈，重復(fù)洗滌 5 次。
加酶結(jié)合物：每孔加入 100 μL HRP 標(biāo)記檢測抗體，封板混勻，37℃孵育 60 min。
洗滌：重復(fù)上述洗滌步驟 5 次，拍干微孔。
顯色：每孔避光加入 90 μL TMB 底物顯色液，輕柔混勻，37℃避光顯色 15 min。
終止：按同等順序每孔快速加入 50 μL 終止液，輕晃混勻，溶液由藍(lán)轉(zhuǎn)黃。
讀數(shù)：15 min 內(nèi)，酶標(biāo)儀 450 nm 波長測定各孔 OD 值，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本含量。
3. 關(guān)鍵質(zhì)控要點(diǎn)
全程孵育使用專用封板膜，防止液體蒸發(fā)、交叉污染。
洗滌充分為實(shí)驗(yàn)核心，殘留洗液易造成背景偏高、假陽性。
TMB 顯色液避光儲存，現(xiàn)用現(xiàn)加，嚴(yán)禁接觸氧化劑。
加終止液順序需與顯色加樣一致，避免局部色差、綠色殘留。
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